菌種的分裝及凍干過(guò)程,菌種分裝安瓿時(shí)可用滅菌的長(zhǎng)滴入安瓿管底部,每管分裝量約0.1~0.2毫升,分裝安瓿管時(shí)間盡量要短,在1-2小時(shí)內(nèi)分裝完畢并預(yù)凍。分裝時(shí)應(yīng)注意在無(wú)菌條件下操作。對(duì)于細(xì)菌制品,預(yù)凍過(guò)程一般通過(guò)“兩步法”來(lái)完成。先是以慢速進(jìn)行降溫,讓細(xì)胞外的溶液中產(chǎn)生冰,細(xì)胞內(nèi)的水分通過(guò)細(xì)胞膜滲向胞外,胞內(nèi)溶液的濃度逐漸提高;然后是以較高速率進(jìn)行降溫,以實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)溶液的玻璃化。菌種預(yù)凍1~2小時(shí)將冷凍后的樣品安瓿管置于凍干機(jī)的干燥箱內(nèi),凍干機(jī)開(kāi)始冷凍干燥,時(shí)間一般為8-20小時(shí)。終止干燥時(shí)間應(yīng)根據(jù)下列情況判斷:①安瓿管內(nèi)凍干物呈酥塊狀或松散片狀;②真空度接近空載時(shí)的較高值;③選用1-2支對(duì)照管,其水份與菌懸液同量,視為干燥完結(jié)。
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